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    实施例3、实施例1制备的试剂盒的准确性验证1、取1ng标准品2800m、样本一、样本二或样本三(见实施例2中步骤二)，按照yfilerpluspcramplifcationkit(thermofisherscientific)的说明书步骤进行毛细管电泳检测，得到各个基因座的等位基因基因型。分型结果见表4，重庆一体化迈杰转化医学NGS平台诚信合作。表4注：m为毛细管电泳检测技术的分型结果，e为二代测序技术的分型结果。2、按照实施例2中步骤一的方法检测标准品2800m、样本一、样本二或样本三，得到各个基因座的等位基因基因型。分型结果见表4。结果表明，实施例1制备的试剂盒与yfilerpluspcramplifcationkit重合的基因座，在标准品2800m、样本一、样本二和样本三中的分型结果完全一致。实施例4、实施例1制备的试剂盒中引物具有不可替换性实施例1制备的试剂盒是本发明的发明人经过大量实验获得的，主要包括扩增各个基因座引物的反复调试和引物浓度的摸索。由于复合的基因座数目较多，引物间相互抑制情况复杂，所以试剂盒中用于扩增各个基因座的引物不可替换。1、设计并合成表5中第2列所示的、用于扩增65个str基因座的引物，然后混合，获得引物混合物1。设计并合成表5中第4列所示的、用于扩增66个str基因座的引物，然后混合，获得引物混合物2，重庆一体化迈杰转化医学NGS平台诚信合作，重庆一体化迈杰转化医学NGS平台诚信合作。迈杰转化医学为全球合作伙伴提供包括生物标记物挖掘、药物靶点验证、伴随诊断开发等一体化解决方案。重庆一体化迈杰转化医学NGS平台诚信合作

    反应体系为20μl，由10μl2×mastermix(德国qiagen公司)、1μl标准品2800m水溶液、引物混合物和无核酶水组成。该反应体系中，各个引物的浓度见表1中第5列。反应程序：95℃5min；95℃30s，60℃2min，72℃2min，28个循环；72℃5min；4℃保存。3、纯化和定量(1)取pcr扩增产物，按照pcrpurificationkit的说明书步骤进行纯化，得到pcr纯化产物。(2)将pcr纯化产物按照qubittmdsdnahsassaykit说明书，采用，得到pcr纯化产物的浓度。4、文库制备取pcr纯化产物，按照truseqdnapcr-freehtlibraryprepkit的说明书操作步骤依次进行末端修复、末端修复产物纯化、连接a-tail、连接adapter和连接产物的纯化，然后按照kapalibraryquantificationkit的说明书步骤进行文库定量及文库标准化，完成文库制备。5、上样测试取步骤4制备的文库，使用miseqreagentkitv3-600cycles测序试剂于miseqfgx二代测序仪上进行测序。6、数据分析测序结束后仪器自动生成fastq文件，使用。运行，在notepad中录入68个基因座基因配置文件。基因座基因配置文件如下：①基因座名称，②y，③正向引物后12个碱基，④反向引物前12个碱基的反向互补序列，⑤该基因座**序列的两个重复单元，⑥一个重复单元的碱基数。 四川抗体全迈杰转化医学NGS平台郑重承诺迈杰转化医学提供完整的多平台多组学服务，打造流程化yao企业合作。

    反应体系为20μl，由10μl2×mastermix(德国qiagen公司)、1μl标准品2800m水溶液、引物混合物和无核酶水组成。该反应体系中，各个引物的浓度见表1中第5列。反应程序：95℃5min；95℃30s，60℃2min，72℃2min，28个循环；72℃5min；4℃保存。3、纯化和定量(1)取pcr扩增产物，按照pcrpurificationkit的说明书步骤进行纯化，得到pcr纯化产物。(2)将pcr纯化产物按照qubittmdsdnahsassaykit说明书，采用，得到pcr纯化产物的浓度。4、文库制备取pcr纯化产物，按照truseqdnapcr-freehtlibraryprepkit的说明书操作步骤依次进行末端修复、末端修复产物纯化、连接a-tail、连接adapter和连接产物的纯化，然后按照kapalibraryquantificationkit的说明书步骤进行文库定量及文库标准化，完成文库制备。5、上样测试取步骤4制备的文库，使用miseqreagentkitv3-600cycles测序试剂于miseqfgx二代测序仪上进行测序。6、数据分析测序结束后仪器自动生成fastq文件，使用。运行，在notepad中录入68个基因座基因配置文件。基因座基因配置文件如下：①基因座名称，②y，③正向引物后12个碱基，④反向引物前12个碱基的反向互补序列，⑤该基因座**序列的两个重复单元，⑥一个重复单元的碱基数。

  上述任一所述复合扩增体系还可包括进行pcr扩增反应所需的试剂。所述“进行pcr扩增反应所需的试剂”不包括pcr扩增反应所需的引物。上述任一所述复合扩增体系可为20μl，由10μl2×mastermix、上述任一所述引物组合和模板组成。2×mastermix具体可为德国qiagen公司的产品。所述模板具体可为浓度为1ng/μl的标准品2800m的水溶液或样品的基因组dna。所述样品可为人口腔拭子。所述标准品2800m具体可为promega公司的产品，产品目录号为dd7251。含有上述任一所述引物组合的试剂盒也属于本发明的保护范围；所述试剂盒的用途可为(h1)-(h5)中的至少一种：(h1)str分型；(h2)y-str分型；(h3)个体识别；(h4)亲权鉴定；(h5)种族推断。本发明还保护上述任一所述复合扩增体系或上述任一所述试剂盒的制备方法；该制备方法包括将上述任一所述引物组合中的各条引物单独包装的步骤。本发明还保护上述任一所述引物组合或上述任一所述复合扩增体系在制备试剂盒中的应用；所述试剂盒的用途可为(h1)-(h5)中的至少一种：。 迈杰转化医学--伴随诊断整体解决方案提供者,检测技术平台全涵盖.

    迈杰转化医学NGS平台现有IlluminaNovaSeq6000、NextSeq500、Miniseq测序仪及QiagenGenereader等一站式临床诊断测序平台，目前已建立的常规检测能力包括WGS、WES、mRNA-Seq，lncRNA-Seq，miRNA-Seq，靶向富集测序，单细胞基因组/转录组测序，免疫组库测序、慢病毒插入位点检测等。平台多次满分通过国家卫生部临检中心（NCCL）及美国病理学家协会（CAP）组织的室间质评与能力认证；已完成20+方法学开发与验证，支持40多个临床实验，完成了数千例余例样本的检测。6、全外显子组测序一种生物的外显子序列的测序，外显子测序需要将全基因组外显子区域DNA捕获并富集后进行测序；人的外显子序列只占全部基因序列的1%，约30MB，是基因组的编码序列；相对于基因组测序分析的信息量小，成本较低。7、转录组测序细胞内转录产物RNA的测序，广义上包括mRNA、核糖体RNA、转运RNA及非编码RNA；狭义指所有mRNA的**。8、靶向测序作者：心平气和链接：源：知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权，非商业转载请注明出处。 迈杰转化医学为创新药企开展全球多中心临床试验研究，提供中心实验室检测及伴随诊断开发服务。重庆多基因联合检测迈杰转化医学NGS平台技术指导

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    室温孵育1分钟。e.孔板再次放上磁力架，等待2分钟，溶液澄清后，转移上清到新的孔板中。三、第二轮多重PCRa.第二轮特异性引物是普通的PCR扩增引物，在其5’端加上测序接头5’-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-3’共80个左右的碱基，其中根据目标区域设计得到的序列长度是20个碱基左右，Tm值设定在60℃，多个引物混成一个IP引物池做为第二轮PCR的上游引物。P7的序列：5’-CAAGCAGAAGACGGCATACGAG-3’。配置PCR总体系，按照理论值的125％配制，震荡混匀，短时离心。b.孔板放入PCR仪中，选择MAPlex-2nd程序运行2个小时。四、PCR产物纯化步骤同二，做两次纯化，彻底去除引物二聚体。***次使用28uL的磁珠纯化，用20uL的NFW洗脱；第二次用20uL的磁珠纯化，用25uL的NFW洗脱。五、电泳鉴定每个样品取5uL，进行％的琼脂糖电泳，观察是否有条带，以及条带长度是否在300-400bp之间。实施例5.文库定量与混合a.将标准品、荧光定量试剂、引物从-20℃取出放置于冰上融化。b.样品稀释10000倍，分两次梯度稀释。***次取文库原液2uL，加入198uL的NFW，振荡混匀或者用***吹打混匀，短时离心。再从中取出10uL，加入990uLNFW，振荡混匀或者用***吹打混匀，短时离心。重庆一体化迈杰转化医学NGS平台诚信合作

迈杰转化医学中心实验室建立了覆盖全平台检测业务的中心实验室，具备STARLIMS系统，用于样本/数据管理，能够提供分子检测、病理检测、蛋白检测、生物大分子检测以及流式和细胞检测等全平台的服务。已经获的CNAS ISO 17025的认证、美国病理学家协会CAP认证证书，并多次通过NCCL室间质评/CAP PT认证，可以提供高质量的服务，同时建立了样本接收和生物样本库，可以满足各类温度要求的样本保存，满足中心实验室的要求。

按照CNAS、ISO 15189和临检要求，建立的临床检测实验室。可进行泛实体ai、肺ai、胃ai等ai种的检测，2018年12月取得临床基因扩增检验实验室技术审核验收合格证书。