深圳市勃望初芯半导体科技有限公司
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芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列(图1C)我们称之为单分子阵列(SiMoA)——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步(图1A),在微球(直径μm)上形成一个三明治抗体复合物,结合的复合物用酶标记,如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品,蛋白质的比值分子(以及由此产生的酶标记复合物)与微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布,导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如,如果在(3000个分子)的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质,并且在200,000个微球上进行标记,则珠子,然后,。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术(例如,平板阅读器)的标签,因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积(通常为),并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。 芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品,低成本、便捷、快速进行微量样本的检测;IVD数字ELISA检测速度快
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA,应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物疫病检测等各种应用场景;参考原理:血液中单个蛋白质分子的检测有助于识别许多新的诊断性蛋白质标记物。我们报告了一种同时检测数百至数千个单独蛋白质分子的方法,该方法能够检测到非常低浓度的蛋白质。蛋白质被捕获在显微珠上,并用酶标记,每个显微珠上有一个或零个酶标记的蛋白质。通过将这些显微珠分离成50飞米的阵列反应室,单个蛋白质可以通过荧光想象检测到。通过单化这些阵列中的分子,~10-20种酶可以在100μL(~10−19M)中检测到。单个基于酶标记的分子酶联免疫吸附试验(数字ELISA)能够检测血清中临床相关的蛋白质,其浓度(<10−15M)远低于传统ELISA3-5。数字ELISA在所有接受防冶性前列腺切除术的患者血清中检测到前列腺特异性抗原,比较低至14fmol/mL(0.4fmol)。
芯弃疾-勃望初芯数字ELISA开放数字化高敏ELISA芯片,可以进行8孔、4孔的灵活检测。
芯弃疾JX-8B数字ELISA 具有超敏的优点:
检测方法为阵列成像。阵列成像涉及对阵列中的每个孔进行检测以确定是否存在微球并判断微球是否具有酶活性。为此,开发了一种图像分析软件,该软件首先创建一个阵列的“掩模”,以定义孔定位和边界进行检测。然后将孔掩模应用于阵列的荧光图像,以确定孔内微球和酶的存在。对于阵列的荧光图像,当进行多重检测时,会生成微球群体或微球亚群的荧光强度直方图。直方图中的峰值自动识别并用于确定微球群体。
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通过SiMoA对酶标记物进行数字检测的线性动态范围由区分“开启”和“关闭”孔的能力决定。在酶与珠子的比例较低(小于约1:10)时,泊松统计表明,只有统计学上有效果的群体珠子是指含有零和一个酶的珠子。只要足够多的珠子被检测,单个酶就可以被检测到,并且活性珠子的数量会超过泊松分布计数活性微球的噪声。在酶与微球的高比率(大于约(1:10),活性珠子的比例变得更高,泊松统计表明有大量含有多种酶的微球。为了定量检测到的酶的数量并保持含有多种酶的微球亚群中的线性对于酶,我们使用泊松统计法将活性珠子的数量转换为检测到的酶的数量 芯弃疾单分子ELISA检测盒,微量极速检测,微量检测15min就完成检测!国产数字ELISA准确宽
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参考的其他高灵敏检测方法: IVD数字ELISA检测速度快
两种更多测试的模拟分析信号放大技术是免疫PCR和生物条形码分析。免疫PCR通过将检测抗体标记为DNA分子,然后使用PCR进行扩增和定量,从而提高灵敏度。生物条形码分析利用了与DNA“条形码”标记的抗分析物纳米颗粒,这些纳米颗粒在与捕获在金微粒上的分析物结合后,从纳米颗粒上脱杂以进行定量。这两种方法相对于传统免疫分析法的灵敏度提高了10到100倍,但尚未整合到所需的全自动系统中,也未用于多重分析。为了比较大限度地加速药物发现、验证新型生物标志物并将分子水平诊断引入临床主流,需要一种具有高效率、高质量数据和成本效益的稳健、多重超灵敏蛋白质检测技术。